γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒(GCANA底物法)使用说明书
[产品名称]
通用名称:γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒(GCANA底物法)
英文名称:γ-Glutamyltransferase Kit(GCANA Substrate Method)
英文简称:GGT Kit
[包装规格]
剂型:液体双剂型
R1:80ml×3 R2:48ml×1
R1:60ml×3 R2:36ml×1
R1:50ml×3 R2:30ml×1
R1:100ml×2 R2:20ml×2
[预期用途]
本产品用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)是催化γ-谷氨酰基转移反应的一种酶。人体器官中γ-谷氨酰基转移酶含量按下列顺序排列:肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。
GGT主要用于诊断肝胆疾病。急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症的急性胰腺炎时都可以升高。酒精或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林者,血清GGT活性常常升高。
在GGT的早期测定中,使用L-γ-谷氨酰基-对硝基苯胺为底物,由于L-γ-谷氨酰基-对硝基苯胺的溶解度限制,不能显示酶反应的最大活性。市售试剂盒几乎都采用了IFCC推荐法,以L-γ-谷氨酰基-3-羧基-对硝基苯胺为底物测定GGT活性[1,2]。
[检验原理]
L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸(双苷肽)在GGT的作用下,生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸,后者在405nm 波长处有最大吸收,其生成量与血清中GGT活性成正比。根据测定405nm波长下吸光度增加的速率,即可测出血清中GGT活性。
[主要组成成份]
说明:
不同批号的试剂不能混用;新打开的试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。
[储存条件及有效期]
1.原包装试剂在2℃~8℃避光贮存,有效期12个月。
2.试剂开盖后在2℃~8℃避光保存,稳定期28天。
[适用仪器]
本试剂盒适用于 HITACHI 7180/7170/7060/7080/7600P、OLYMPUS AU 400/640/2700/5400 、BECKMAN DXC-800、 TOSHIBA 40FR/120FR全自动生化分析仪。
[样本要求]
1.样本种类:新鲜无溶血血清。
2.样本采集:取空腹静脉血3ml,置于玻璃管中或采用含有分离胶的真空采血管,标本采集后,分离血清。
3.样本干扰:对反应吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果,遇上述情况建议重新采集[3]。
4.样本保存:样本2℃~8℃可稳定7天,-25℃~-15℃可保存1个月,忌反复冻融。
[检测方法]
1.试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
2.检测步骤:
(1)基本操作步骤:[波长:405nm(400 nm~420nm)温度:37℃
比色杯光径:1cm]
(2)全自动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样本加载→测定→结果审核→报告。
3.校准:用K因数校准,也可使用Roche 校准品校准。当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
4.质量控制:每天对样本进行检测之前,须进行质量控制,以保障测试系统的稳定性。建议采用本公司生化多项质控品或者Roche质控品进行室内质控,质控品测定结果应在允许范围内。若超出质控范围,需查找原因,如仪器、试剂与质控品的状态或参数设置等。
5.检验结果的计算:生化分析仪会自动给出检测结果。
5-氨基-2-硝基苯甲酸在405nm波长下毫摩尔消光系数=9.5。
[参考范围]
根据参考文献[4]获得以下参考范围(37℃):
各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。
[检验结果的解释]
专业人员负责检验结果的审核。检验结果会受到受检者年龄、性别、体重等的影响。通常情况下,其结果如在参考范围内,认为正常;如在临界区域内,应重新测定进行确认;如明显超出参考范围或确认检测后仍超出参考范围,则认为γ-谷氨酰基转移酶的活性异常。检验结果如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。
[检验方法的局限性]
1.乳糜(Intralipid)≤500mg/dl时,对测定结果没有明显干扰。
2.血红蛋白≤200mg/dl时,对测定结果没有明显干扰。
3.Vc≤100mg/dl时,对测定结果没有明显干扰。
4.胆红素≤40mg/dl时,对测定结果没有明显干扰。
5.检测结果与所使用的仪器种类、型号和校准品相关,使用不同的仪器或校准品,检测结果可能会有差异。
[产品性能指标]
1.外观:a) R1应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。b) R2应为浅黄色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。
2.试剂空白吸光度:在波长405nm(400nm~420nm)(光径1cm)处,试剂空白吸光度(A)≤1.000;试剂空白吸光度变化率(△A/min)≤0.005。
3.准确度:出厂检验:测定Roche质控品,测定值与标示值的相对偏差应不超过±10%。型式检验:测定国家标准物质GBW(E)090283,测定结果的相对偏差应不超过±10%。
4.分析灵敏度:活性为110U/L的GGT所引起的吸光度变化率(△A/min)应在0.020~0.080范围内。
5.重复性:重复测定结果的变异系数(CV)应≤5%。
6.批间差:试剂盒的批间差(R)应≤6%。
7.线性范围:在5U/L~1000U/L 范围内,线性相关系数(r)应≥0.990;
在50 U/L~1000 U/L范围内,线性相对偏差应不超过± 10 %;在5 U/L~50 U/L范围内,线性绝对偏差应不超过± 5 U/L。。
[注意事项]
1.试剂避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
2.使用前应该认真阅读产品说明书,使用后的器具须按照相关医疗废弃物的处理规定处理。
3.由于运输过程产生渗液或漏液的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
4.本产品仅适用于临床体外诊断,需专业人员使用。
5.如医院使用其它型号的全自动生化分析仪,请各医院根据实际需要进行验证。
6.如医院使用其它公司校准品进行校准,请各医院根据实际需要进行验证。当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养、重要零件更换时应重新进行校准。
[标签中图标解释]
[参考文献]
1.陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006。
2.Shaw LM, Strome JH, Lindon JL et al. Approved recommendation (1983) on IFCC Methods for the Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes, Part 4. IFCC Method for gamma-glutamyl transferase, J Clin. Chem Clin Biochem, Vol. 21, 1983, 633-646.
3.王惠萱、李雪梅、王珂主编,临床检验标本采集手册,云南科技出版社,2008。
4.中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第3版), 东南大学出版社,2006。
[生产企业]
企业名称:中生北控生物科技股份有限公司
[医疗器械生产企业许可证编号]
京药监械生产许20000271号
[医疗器械注册证书编号]
京械注准20192400192
[产品标准编号]
YZB/京 1746-2013
[说明书批准日期及修改日期]
2014年9月22日